丙烯酰胺/甲叉 29:1,30%溶液
产品简介:
30% Acr-Bis(29:1)即为含 30%acrylamide-bisacrylamide 的水溶液,其中 acrylamide 和bisacryis(29:1)常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE 胶),包括SDS-PAGE 胶等,常用于蛋白或核酸的分离。是实验室的常用储备液。
使用方法:
1、 Laemmli gel with 30% Acr-Bis(29:1)
| 5%浓缩胶 | 8%分离胶 | 10%分离胶 | 12%分离胶 | 15%分离胶 |
组份 | 2 ml | 5 ml | 5 ml | 5 ml | 5 ml |
H2O | 1.4 ml | 2.25 ml | 1.95 ml | 1.65 ml | 1.15 ml |
30%Acr-Bis(29:1) | 0.33 ml | 1.4 ml | 1.7 ml | 2 ml | 2.5 ml |
1 M Tris pH6.8 | 0.25 ml | - | - | - | - |
1.5 M Tris pH8.8 | - | 1.25 ml | 1.25 ml | 1.25 ml | 1.25 ml |
10% SDS | 20 μl | 50 μl | 50 μl | 50 μl | 50 μl |
TEMED | 2 μl | 5 μl | 5 μl | 5 μl | 4 μl |
10% APS | 20 μl | 50 μl | 50 μl | 50 μl | 40 μl |
凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据标准条件调节催化剂的加入量。
2、DNA非变性PAGE with 30% Acr-Bis(29:1)
最佳DNA分离范围 | 凝胶浓度 | 各组份体积(ml) | 总体积 |
灭菌水 | 30%PAA (29 :1) | 5×TBE | 10%APS | TEMED |
80-500 bp | 5% | 63.3 | 16.7 | 20 | 0.8-1 | 0.1 | 100 ml |
70-450 bp | 6% | 60 | 20 | 20 | 0.8-1 | 0.1 | 100 ml |
60-460 bp | 8% | 53.3 | 26.7 | 20 | 0.8-1 | 0.1 | 100 ml |
50-300 bp | 10% | 46.7 | 33.3 | 20 | 0.5-0.8 | 0.1 | 100 ml |
40-200 bp | 12% | 40 | 40 | 20 | 0.5-0.8 | 0.1 | 100 ml |
25-150 bp | 15% | 30 | 50 | 20 | 0.5 | 0.1 | 100 ml |
5-100 bp | 20% | 13.3 | 66.7 | 20 | 0.5 | 0.1 | 100 ml |
注:
① 有大量文献报道PAGE胶中加入5%-10%的甘油能提高某些位点的分辨率。如果选择加入10%的甘油,则减少去离子水的用量 10 ml,同时加入10 ml甘油。
② 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。
注意事项:
1、30% Acr-Bis(29:1)有一定毒性,使用时请注意适当防护。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:4℃避光保存,至少一年有效。